İn Vitro Ortamda Koç Testis Hücreleri ve Epididimal Spermatozoa Üzerine Bir Herbisit Olan Florasulamın Toksik Etkisi

Abstract

Florasulam herbisit etkisine sahip bir zirai ilacıdır ve yeni nesil bir ilaç bileşeni olarak kullanımı yaygınlaşmaktadır. Bu çalışmanın amacı, florasulamın koç testis hücreleri ve spermatozoa üzerindeki in vitro etkisini araştırmaktır. Spermalar yerel bir mezbahadan elde edilen koç testislerinden sağlanacak. Farklı florasulan dozlarına (0-1000 µg), farklı inkübasyon sürelerinde (0, 2, 4, ve 6 saat) 37 °C su banyosunda maruz bırakılan spermatozoa, motilitesi, canlılık, akrozom bütünlüğü, mitokondrial memran potansiyeli ve apaptozis yönünden değerlendirilecek. Koç testis hücreleri yine yerel bir mezbahadan elde edilen sığır testislerinden izole edilecek. 1.0x104 hücre/kuyucuk ve 1.5x106 hücre/kuyucuk, 96 ve 12 bölmeli hücre kültür plaklarında 24 saat inkübe edilecektir. Daha sonra farklı konsantrasyonlarda (0 - 1000 μg / ml) florasulam 48 saat süreyle hücrelere uygulanacak. Sitotoksisite, ticari WST-1 kiti kullanılarak kolorimetrik bir yöntemle ölçülürken, hormon seviyeleri elektrokemilüminesans immünoassay ile ölçüleçek.

Florasulam has a herbicide effect and used in agriculture to control. Its use is becoming widespread as a new generation pesticide ingredient. The point of this study is to investigate the in vitro effect of florasulam on ram testicular cells and spermatozoa. The sperm will be collected from the ram testes obtained from a local slaughterhouse. Motility, viability, acrosome integrity and mitochondrial membrane potential (MMP) exposed to florasulan doses between (0--1000 µg), were evaluated at different incubation time (0, 2, 4, and 6 h) in 37 ℃ in water bath. The cells will be isolated from the bovine testes obtained from a local slaughterhouse. 1.0x104cell/well and 1.5x106 cell/well will be seeded in 96-well and 12-well culture and will be incubated for 24 h for attachment. After that, florasulam treatment at different concentrations (0 -- 1000 μg/ml) was applied to cells for 48 h. Cytotoxicity was measured with a colorimetric method using commercial WST-1 kit and hormone levels were measured by electrochemiluminescence immunoassay.