Subklinik mastitisli süt ineklerinde meme içi levamizol uygulanmasında süt ve kanda glutasyon peroksidaz, süperoksit dismutaz, alkalen fosfataz ve immunoglobulin G düzeyleri

Abstract

Bu çalışma subklinik mastitisli ineklere, immıınomodulatör etkisi olduğu bilinen levamizoliin meme içi uygulanmasının, kan ve sütte gkıtatyon peroksidaz (GSH-Px), süperoksit dismutaz (SOD) aktiviteleri ve alkalen fosfataz (ALP) ve immunoglobulin G (IgG) düzeyleri üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacı ile yapılmıştır. Araştırmanın materyalini, 4-5 yaşlı 40 Holstein ırkı inek oluşturmuştur. Deneme ve kontrol grubunun balirlenmesi, sütte Kaliforniya mastitis test (California mastitis test-CMT) ve somatik hücre sayımı (somatic cell count-SCC) sonuçlarına göre yapılmıştır. CMT (-) ve SCC < 300.000 olan 20 inek kontrol grubunu. CMT (+) ve SCC > 300.000 olan 20 inek ise deneme grubunu oluşturmuştur, ineklerden levamizol uygulaması öncesi kan örnekleri vena jugularis'ten 10 mi, süt örnekleri ise her bir ineğin iki meme lobundan 20 mi alınmıştır. Kanlar 3000 rpm'de 10 dakika santrifüj edilmiş ve serumları ayrılmıştır. Sütlere l mi %0,3'lük peynir mayası eklenip, 37°C'lik su banyosunda 20 dakika bekletilerek pıhtı oluşumu sağlanmış ve 80 dakika sonra pıhtı çizilerek süt serumları ayrılmıştır. Kan ve süt serumlarında GSH-Px aklivitesi fotometrik SOD ile ALP aktivitesi spektrofotometrik, IgG düzeyi radial immıınodiffüzyon yöntemiyle ölçülmüştür, ineklere 6 gün boyunca, sabah sağımdan sonra meme içi 20 mi %4'lük levamizol uygulanmıştır. Uygulama periyodu sonunda kan ve süt örnekleri toplanarak, uygulama öncesi yapılan analizler tekrarlanmıştır. Levamizol uygulaması öncesinde, subklinik ınastilisli ineklerin kanında GSH-Px, SOD, ALP aktiviteleri ile IgG düzeyleri sırası ile 0,67 nmol/NADPH+H+/dak/mg-prol, 4,85 U/g-prot, 124, l U/L ve 27g/L olarak tespit edilmiştir. Uygulamadan sonra ise sırası ile 0,60 nmol/NADPH+H+/dak/mg-prot, 3,87 U/g-prot. 124.4 U/L ve 27g/L olarak bulunmuştur. Süt serumunda ise bu parametrelere ait değerlerin, uygulama öncesinde sırasıyla 0,78 nmol/NADPH+H+/dak/mg-prot, 21,5 U/g-prot, 591 U/L, 0,38 g/L, uygulama periyodu sonrasında ise sırası ile 0,22 mnol/NADPH+H+/dak/mg-prot, 10,4 U/g-prot, 596 U/L, 0,45g/L olduğu belirlenmiştir. Subklinik mastitisli ineklerde meme içi levamizol uygulamasının süt serumunda GSH-Px, bunun yanında kan ve süt serumunda SOD aktivitesini düşürdüğü (GSH-Px için p<0.01; SOD için p<0.001) anlaşılmıştır. ALP aktivitesi ve IgG düzeyleri mastitisli grupta kontrolden yüksek bulunmuştur ve levamizol uygulaması, her iki parametrenin değer artışına neden olmuştur.

This study was carried out in order to determine the activity of glutathione peroxidase (GSH-Px). superoxide dismutase (SOD), alkaline phosphatase and immunoglobuline G in blood and milk after administration of intramammary levamisole known as immunomodulatory substance. Forty Holstein cows, 4-5 years of constituted the material of study. Control and trial group were formed according to the results of California mastitis test (CMT) and somatic cell count (SCC). Twenty cows with CMT (-) and SCC &lt; 300.000 defined as control group, CMT (+) and SCC &gt; 300.000 were trial group. Ten ml of blood samples were collected from vena jugularis and 20 ml of milk samples from two mammary lobes were collected just before administration of levamisole. Blood samples were centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes and serum were separated. One ml 0.3% were added, curt was formed by incubating in water bath for 20 minutes and after 80 minutes by scratching the curt milk serum was obtained. Analysis of GSH-Px activity is done by photometric, SOD activity, ALP levels by spectrophotometric and IgG levels radial immunodiffusion method in blood and milk. Twenty ml 4% levamisole were administered to cows for 6 days on the mornings just after milking. After administration period same analysis were made to recollected blood and milk samples. Before levamisole administration, the activity ol GSH-Px and SOD, alkaline phosphatase activities and immunoglobuline G levels of blood in cows with subclinical mastitis were 0,83 nmol/NADPH+H+/min/mg-prot, 4,85 U/g-prot, 124.1U/L ve 27 g/L, respectively. After administration period is as follows 0,60 nmol/NADPH+H+/min/mg-prot, 3,87 U/g-prot, 124.4U/L ve 27g/L. Values of these parameters in milk serum were 0.78 nmol/NADPH+H+/min/mg-prot, 21,5 U/g-prot, 591 U/L, 0,38 g/L respectively before levamisole administration, 0,22 nmol/ NADPH +H+/min/mg-prot, 10,4 U/g-prot, 596 Ug/L, 0,45 g/L, respectively after administration period. Intramammarial administration of levamisole decreases the GSH-Px activity of milk serum also SOD activity of blood and milk serum (p values for GSH-Px and SOD p&lt;0.01 and p&lt;0.001, respectively). In trial group ALP activity and IgG levels in blood and milk serum was higher than control group as p&lt;0.01 and increased after levamisole administration.