Yazar "Şahingöz, Durukan" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • Küçük Resim
    Öğe
    SiRNA iletimi için lazer ablasyon yöntemi kullanılarak polietilenimin ile kaplanmış altın nanopartikül üretimi
    (Kırıkkale Üniversitesi, 2018) Şahingöz, Durukan; Keskin, Ayten Çelebi
    Hücrelere gen aktarımı son zamanlarda sıklıkla artan çalışmaların temelini oluşturmaktadır. Özellikle siRNA' nın aktarımı bu olaylarda başı çekmektedir. DNA- temelli terapötikler, plazmid içerisinde, antisens oligonukleotidler ve küçük RNA parçaları (siRNA) olarak uygulanmaktadır. Gen terapisi, genetik temeli bulunan hastalıkların tedavisinde stratejiler geliştirmek için kullanılan ve günümüzde tedavisi olmayan hastalıklar için umut vaat eden bir yöntemdir. Başarılı bir gen terapisi, ilgili transgenlerin hedeflenmiş hücrelere transfeksiyonunu gerektirir. Dolayısıyla gen terapisinin iyileştirici etkisi büyük ölçüde uygun gen sağlama vektörlerinin mevcudiyetine bağlıdır. Viral gen sağlama vektörleri yüksek verimlidir fakat hem immünojeniteye hem de sitotoksisiteye sahiptir. Nonviral gen dağıtım vektörleri, hem düşük toksisite hem de düşük immünojenite gösterdikleri için giderek daha fazla ilgi görmektedir. Geniş nanopartikül türleri arasında soy metal nanopartiküller son yıllarda özellikle yüzeyel plasmon rezonansı (SPR) da dahil olmak üzere biyouyumluluk ve eşsiz fiziksel ve kimyasal özelliklerinden ötürü altın nanopartikül (AuNP)' lere önem vermişlerdir. Son zamanlarda, sıvı fazda bir altın hedefin darbeli lazer ablasyonu, çoğunlukla kimyasal indirgeme yöntemi ile üretilirken AuNP' leri sentezlemek için çekici bir alternatif olarak benimsenmiştir. Bu çalışmanın amacı hastalıkların tedavisinde kullanılan ve gen susturma işlemleri için gerekli olan siRNA' yı Polietilenimin (PEI) ile modifiye edilmiş AuNP'ler ile birleştirerek, siRNA iletimi için bir yaklaşım oluşturmaktır. Bu tez kapsamında yapılan işlemler başlıca dört aşamadan oluşmaktadır; İlk bölümde farklı konsantrasyonlarda (%1, %2, %5) PEI çözeltisi hazırlanmış, ikinci kısımda hazırlanan PEI çözeltisi içerisinde lazer ablasyon yöntemi ile altın nanopartiküller üretilmiştir. Üçüncü kısımda üretilen altın nanopartiküllerin Zeta-Sizer cihazıyla boyutlarına ve zeta potansiyellerine bakılmıştır. Ayrıca FTIR spektroskopisi yapılmış ve nanopartiküller karakterize edilmiştir. Dördüncü ve son kısımda farklı oranlardaki AuNP/PEI/İF kompleksleri ile farklı oranlardaki (100 nM, 200 nM) siRNA bağlanmaya çalışılmıştır. Bağlanıp bağlanmadıklarını anlamak için agaroz jel elektroforezi yapılmıştır ve ultraviyole (UV) ışınları altında gözlemlenmiştir. Elde edilen sonuçlara göre AuNP'lerimizin katyonik özellikte olduğu gösterilmiştir. Ayrıca boyut analizlerinin de 100 nm'nin altında olduğu belirlenmiştir. FTIR testi ile PEI/AuNP kompleksinin birbirine bağlandıkları, agaroz jel elektroforezi ile de siRNA ile birleşmenin sağlandığı ve hücreye aktarılma aşamasına hazır hale getirilen bir taşıyıcı sistem olduğu gösterilmiştir. siRNA'nın kanser tedavisinde PEI/AuNP/İF kompleksleri ile birlikte kullanılabileceği ilk kez yapılan bu tez çalışması ile gösterilmiştir.