İyon değiştirici poli(akrilik asit-ko-akrilamid) membranların hazırlanması: immunoglobulin G'nin kan plazmasından saflaştırılması ve membranların seçiciliğinin HPLC ile tayini
[ X ]
Tarih
2006
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Triazin boyaları farklı moleküler yapıya sahiptir ve proteinlere karşı spesifik olarak afmite göstermektedir. Ligand özelliğine sahip boyalar serbest -OH ve -NH2 grubu bulunan sentetik ve doğal polimerik destek malzemelerine alkali ortamlarda kolay bir yolla bağlanmaktadır. Aynı zamanda, boya ligandlar yüksek kimyasal ve biyolojik kararlılığa sahiptir. Triazin boyaların maliyetinin düşük olması ve adsoplanan proteinlerin tutuklanmış boya ligandlardan elüsyonunun kolay olması boya-afînite ayırımlarının gelecekteki önemini daha da artırmaktadır. Membran yapıdaki polimerik destek malzemeleri kromatografı alanında kullanılan geleneksel küresel yapıdaki malzemelere göre çok sayıda avantajlara sahiptir. Membran tipi destek malzemeleri ile sürekli sistemlerde kolon sıkışması, basınç artması ve akış hızı azalması gibi sorunlar ortadan kalkmaktadır. Membran afınite ve/vaya iyon değiştirici kromatografısinde kullanılan destek malzemeleri temel olarak sentetik ve doğal olmak üzere iki grup altında toplanmaktadır. Membran kromatografısinde destek materyalinin seçimi ve hazırlanma yöntemi kromatografîk performansı etkileyen önemli bir faktördür. Bu çalışmada, iyon değiştirici özelliğe sahip farklı kompozisyonlarda p(akrilik asit-ko-akrilamit), p(AAa-ko-AAm), hidoj elleri hazırlanarak yeni bir kromatografîk destek malzemesi hazırlandı. Bu projede, farklı kompozisyonlarda p(AAa-ko-AAm) kopolimer afmite membranları UV foto-polmerizasyon yöntemi ile hazırlandı ve boya ligandı Procion Green H-4G membran yüzeyine kovalent olarak bağlandı. Membranlarm immünoglobulin g (IgG) adsorpsiyon kapasiteleri test edildi ve kopolimer membranlarm kromatografî alanında kullanım verimlilikleri incelendi. Proje kapsamında, sentezlenen membranlarm adsorpsiyon kapasiteleri AAa:Aam oranları ve polimerizasyon koşulları değiştirilerek iyon değiştirici membranlarm performanslarına etkileri araştırıldı ve membranlarm karakterizasyonu yapıldı. p(AAa-ko-AAm)-PG ve p(AAa-ko-AAm) membranları ile maksimum adsorpsiyon pH 6.0 değerinde elde edildi ve membranlarm IgG adsorplama kapasiteleri ise sırası ile 146.7 ve 138.1 mg/g olarak belirlendi. İyon değiştirici membranlarınm adsorpsiyon kapasitelerinin artan iyonik şiddet ile azaldığı ve artan ortam sıcaklığı ile ise arttığı gözlendi. p(AAa-ko-AAm) membram ile sulu ortamdan IgG adsorpsiyonun Langmuir ve Freundlich adsorpsiyon izoterm modellerine uygunluk gösterdiği belirlendi. Ayrıca, p(AAa-ko-AAm) membramna IgG adsorpsiyonu işleminde en iyi uyan kinetik eşitliği belirleyebilmek için deneysel veriler birinci Ve ikinci derecen kinetik modelleri kullanılarak analiz edildi. p(AAa-ko-AAm) iyon değiştirici membramna IgG adsorpsiyonunun birinci derece kinetik eşitliğine daha uygun davrandığı belirlendi. Plazmadan saflaştırılan IgG'nin saflıkları Jel Elektroforezi kullanılarak belirlendi.
Açıklama
01.08.2006
Anahtar Kelimeler
Kimya, Tıbbi, Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji
